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RNA Pulldown、DNA Pull-down原理及步驟
RNA Pulldown、DNA Pull-down原理及步驟
更新時間:2025-02-06
訪問量: 3802
廠商性質: 生產廠家

提供商:上海研謹生物
服務項目:RNA Pulldown、DNA Pull-down實驗原理及步驟
實驗周期: 1-2個月
價格:2000元
收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電詳詢!

RNA Pulldown、DNA Pull-down原理及步驟產品概述:

RNA Pulldown、DNA Pull-down實驗代做

 

 

實驗意義

 

核酸與蛋白質的互作是細胞功能的核心,包括蛋白質合成、mRNA組裝等生命活動中重要的代謝過程,研究核酸與蛋白質的互作是研究生命科學的基本工具。

 

實驗原理及步驟

RNA Pull-down:通過體外轉錄RNA并用生物素進行標記,然后與胞漿蛋白混合物共同孵育形成RNA蛋白質復合物,然后用鏈霉親和素標記的磁珠分離純化該復合物(利用生物素與鏈霉親和素的非共價親和作用)。洗脫后進行檢測,如果檢測蛋白為已知蛋白可通過WB進行鑒定,如果檢測未知蛋白則可以結合質譜進行鑒定。流程為提取細胞胞漿蛋白樣品液- -體外轉錄合成生物素標記RNA-共孵育_ -磁珠純化- -洗脫得到互作蛋白. -WB或質譜鑒定。

DNA Pull-down:通過合成標記有生物素的DNA----片段,與細胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白質復合物,然后用鏈霉親和素磁珠純化,WB或者質譜進行檢測鑒定。流程為提取核蛋白樣品液- -合成生物素標記DNA-共孵育- -磁珠純化- ~洗脫

得到互作蛋白- -WB或質譜鑒定。

 

結果展示

RNA Pull-down

 

 

 

 

DNA Pull-down .

 

 

 

實驗周期及交付標準

1.實驗周期: 1-2個月

2.交付標準:

RNA Pull-down:探針序列、X光片.實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)

DNA Pull-down:探針序列、X光片.實驗報告(實驗步驟.試劑、儀器等)

 

需確認信息

1.目的基因種屬及ID號

2.基因序列信息

3.樣本種屬及類型

4.樣本數量.

5.分析要求

參考文獻

[1]Chen R,Liu Y,Zhuang H,et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts with

DBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.

[2]Tran D H , Shishido Y,Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking region

of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and

mass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.

 

 

實驗代做服務:

 

免疫組化IHC染色實驗服務

細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務實驗服務

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

免疫共沉淀(CHIRP)實驗

RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

酶聯免疫(ELISA)技術服務

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測試劑盒

組織芯片/微陣列定制技術服務

 

染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務

 

多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

免疫細胞化學ICC實驗服務

ATP/ADP檢測實驗服務

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實驗服務

PKC活性檢測實驗

非標定量實驗

(Label-free)

 

DIGE技術實驗服務

端粒酶活性檢測實驗

細胞生長曲線的測定

掃描電鏡服務

NF-KB p65活性檢測實驗

 

慢病毒包裝實驗服務

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