色偷偷噜噜噜亚洲男人丨99久久精品国产波多野结衣丨.一区二区三区在线 | 欧洲丨国产麻豆精品久久一二三丨丰满爆乳在线播放

當前位置:
首頁 > 技術文章 > EL4 小鼠淋巴瘤細胞傳代/復蘇技巧
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
EL4 小鼠淋巴瘤細胞傳代/復蘇技巧
點擊次數:476 更新時間:2024-07-31

EL4 小鼠淋巴瘤細胞

Mouse Lymphoma Cells ,EL-4

貨號:YJ-m017(種屬鑒定)

價格: 1800.0

規格: 1*106

細胞介紹

EL4是從用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中誘導的淋巴瘤中建立的。能抗0.1 mM 氫化可的松,對20 mcg/ml PHA敏感。 還有一個亞株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。

細胞特性

1 來源:T 淋巴細胞;淋巴瘤

2 形態:淋巴母細胞  懸浮培養

3 含量:>1x10^6 細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1) 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基)。

4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                      

一.培養基及培養凍存條件準備

1 準備DMEM(推薦YJ-128-0001NaHCO3 1.5g/LGIBCO,貨號12800017,添加NaHCO3 1.5g/L)培養基;馬血清 10%;雙抗,1%

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

懸浮狀態下生長的細胞,可以通過向培養瓶中添加完全培養基來維持細胞的生長狀態,一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6/mL(不同細胞對密度要求不同,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

EL4 小鼠淋巴瘤細胞傳代/復蘇技巧


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

實驗技術服務:





滬公網安備 31011802001676號

主站蜘蛛池模板: 欧美日韩一本无线码专区| 亚洲欧美日韩综合在线一| 麻豆熟妇人妻xxxxxx| 国产成人av 综合 亚洲| 伊人久久大香线蕉综合网| av无码中文字幕不卡一区二区三区| 亚洲同性猛男毛片| 在线看无码的免费网站| 久久久噜噜噜久久免费| 久久久久人妻一区精品色| 疯狂撞击丝袜人妻| 久久精品国产成人午夜福利| 久久精品成人免费国产| 无遮挡十八禁污污网站在线观看| 波多野吉衣av无码| 99这里只有精品| 老师露双奶头无遮挡挤奶视频 | 精品午夜福利无人区乱码一区| 性强烈的欧美三级视频| 国产成人无码aa精品一区| 最新国产精品自在线观看| 夜夜爽妓女8888888视频| 久久影院午夜伦手机不四虎卡| 亚洲国产欧美在线人成人| 亚洲色成人网站www永久尤物 | 国产制服丝袜欧美在线观看| 大学生高潮无套内谢视频| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 亚洲永久网址在线观看| 国产精品久久久久影院| 国产精品a久久777777| 国产美女牲交视频| 亚洲人交乣女bbw| 四虎影视884a精品国产| 怡红院精品久久久久久久高清| 国产高清不卡一区二区| 精品综合久久久久久888| 亚洲国产精品无码一区二区三区| 欧美一区二区三区久久综合| 辽宁熟女高潮狂叫视频| 日本三级手机在线播放线观看 |